母源性促子猪生长发育生物活性因子的研究
猪初乳和羊水中含有多种生长因子,这些乳源性生长因子在促进新生子猪胃肠道生长发育以及提高损伤黏膜修复等方面起着重要的调节作用。
母乳和羊水成分非常复杂,含有功能各异又不可或缺的生物活性物质,包括免疫防御性物质、水解酶、激素和各种生长因子等,这些生物活性物质在胎儿和新生动物的生长发育调控中起着非常重要的作用。笔者就猪乳和羊水这些母源性营养源中研究较多的生物活性物质在子猪肠道中吸收利用以及对子猪生长发育的调控作用等方面进行综述。
猪母源性生物活性成分
抗感染因子母源性营养源中含有许多抗感染性因子,初生子猪免疫系统尚不完善的情况下有着至关重要的作用,母源性的抗感染生物活性因子主要包括免疫球蛋白、转铁蛋白、溶菌酶、过氧化物酶、寡糖和免疫细胞。生产实践中,早期断奶子猪由于脱离母乳,又遭遇肠道微生物的感染而导致腹泻是造成子猪死亡的重要原因之一。
免疫球蛋白 猪初乳中存在 3 种免疫球蛋白 ( IgA IgG 和 IgM 其中在早期初乳中 IgG 含量最高,占免疫球蛋白总量的 76% 常乳时含量极少。分娩后第 3 天, IgA 逐渐成为猪乳中主要的免疫球蛋白。母乳中 IgG 和 IgA 含量的变化从正面反映出随着子猪肠道功能的完善和免疫功能的健全,通过吸收母乳中免疫球蛋白而获得的主动免疫逐渐被自身主动免疫所取代。猪乳中的 IgG 全部来自于母体血液,初乳中 IgG 可以被新生子猪直接吸收进入血液循环,起到抵抗细菌和病毒侵袭的作用,猪初乳中的 IgG 比常乳中的更容易被子猪肠道吸收。试验结果说明,猪初乳中的生物活性物质可能促进了子猪对免疫球蛋白的吸收。母乳中的 slgA 新生子猪消化道黏膜上发挥免疫作用, sIgA 可以与相应病原微生物结合,抑制肠道内的细菌吸附到易感细胞上,构成了新生子猪的第一道免疫屏障。
转铁蛋白 转铁蛋白是 80ku 具有杀菌作用的糖蛋白,母源性转铁蛋白在防止胎儿期和新生期子猪胃肠道感染方面发挥重要的作用。子猪出生时铁的贮存和奶中铁浓度的增加都不足以避免子猪的缺铁性贫血,贫血和腹泻是子猪死亡的两个主要原因。乳铁蛋白可能通过与细菌竞争铁离子来杀菌,也可能直接结合到细菌的外表,破坏其细胞壁并导致病原细菌死亡。乳铁蛋白还能通过受体介导机制可能促进人体对铁的吸收,乳铁蛋白以其在杀菌和治疗贫血方面的功效,饲料添加剂和药物开发方面有较好的前景,国每年有大量的牛乳清和牛初乳可供提取乳铁蛋白利用,另外微生物异源表达以及通过生物反应器进行转基因表达都有可能使乳铁蛋白的工业化生产变为现实。乳铁蛋白的工业化生产变为现实。其他抗感染物质猪乳中,尤其是乳清和脂溶性的黏膜片段,含有各种寡糖和糖蛋白。这些寡糖和糖蛋白通过和产肠毒素的细菌竞争肠道上皮的受体,来阻止细菌黏附于肠道上皮细胞。乳中甘油三酯水解形成的不饱和脂肪酸和甘油一酸酯可以破坏包被的病毒。
激素和生长因子 目前,母乳、羊水和脐带血中主要发现的激素和生长因子有表皮生长因子 ( EGF 胰岛素类生长因子 -I IGF-I IGF-Il 转化生长因子 b TGF-b
表皮生长因子 ( EGF 表皮生长因子是一个含有 53 个氨基酸的多肽,分子量约为 6ku 该多肽具有广泛的生物学作用,包括抑制胃酸分泌和刺激肠道上皮细胞的生长和分化。 EGF 已经在猪牛、大鼠和小鼠多种动物身上发现,并且存在于多种和肠道发育有关的生理液中,包括羊水、唾液、母乳和胆汁。 EGF 子猪胃肠腔中具有较好的稳定性,这也几乎是所有生物活性因子的共性。分别将 EGF 置于哺乳中和断奶后的子猪的胃内容物中,培养 20 分钟后发现其降解率分别为 5% 和 15% 目前,已有不少实验研究了外源 EGF 对子猪肠道上皮成熟和功能发展的影响。通过给孕期 24 天和 31 天的母兔注射 EGF300 μ g 千克 · 天 ) 能使 IUGR 胎儿体重和肠道发育正常化。 EGF 还在 IUGR 胎儿易患的坏死性肠炎有治疗和恢复作用。对于刚断奶的 21 日龄的子猪,口服 372 μ g EGF 处置 3 天后,空肠中乳糖酶和蔗糖酶活性分别提高了 77 %和 97 %。
胰岛素类生长因子 ( IGF 胰岛素类生长因子是胰岛素家族的成员,包括胰岛素、 IGF-I IGF- Ⅱ和松弛素。其中 IGF-I 和 IGF- Ⅱ分别是含有 70 和 67 个氨基酸片段的多肽,分子量分别约是 7.6ku 和 7.5ku IGF-I 和 IGF- Ⅱ 的结构在物种间是高度激进的泌乳前 4 周内,猪乳中 IGF- Ⅱ 的浓度高于 IGF-I IGF-I 和 IGF-II 猪分娩时的初乳中浓度最高,并且在分娩后的两天迅速下降。目前在猪乳中发现有 6 种结合蛋白,这些结合蛋白可能有调节相应的多肽与他目标组织结合的能力,并且维护这些多肽在胃肠道中免遭蛋白酶的分解 IGF-I 哺乳猪胃肠道中保持较高的稳定性。分别在哺乳猪和断奶子猪的肠内容物中培养时,则发现降解率分别为 3%~37% 和 53%~62% 空间上,小肠前段的 IGF-I 降解率显著低于小肠后段的肠液内加入猪初乳时就会发现 IGF-I 降解率都有所降低。根据目前的研究进展,已有许多实验证明, IGF 具有促进胎儿和新生期动物肠道组织生长和功能成熟的效果。一方面在 IGF 对宫内生长受限 ( IUGR 胎儿生长发育发面的研究较多。羊水中注射或胎儿静脉注射一定量的 IGF-I 能够改善 IUGR 胎儿期的绵羊的生长率,以及显著增加绵羊胎儿的肠道重量。另一方面集中在 IGF 与新生动物肠道发育上。人工饲喂含有每升 2 毫克的 IGF-I 或者每升 0.44 毫克的 IGF- Ⅱ配方乳的子猪,肠道隐窝的细胞分化迅速增加。而给新生子猪饲喂添加了每升 l0 毫克 ~20 毫克的 IGF-I3.5 毫克/千克 · 天 ) 4 天,发现子猪的肠重、 DNA 含量和绒毛高度都增加了
转化生长因子 - β ( TGF- β ) TGF- β 是一个分子量为 25ku 二聚蛋白质分子,胚胎发生、炎症、骨发生和免疫球蛋白调节上有作用。目前发现 TGF- β有 3 种异构体为 TGF- β 1 TGF- β 2 和 TGF β -3 TGF- β 从细胞分泌出来时以前体的形式存在需要经激活方能显示出其生物学活性。分娩时的猪初乳中的 TGF- β 的浓度在每毫升 126ng~260ng 之间,但在分娩后 l2 小时就下降到毫克 73ng 吃初乳的新生子猪 TGF- β 受体少于吃常乳和代乳料的也就说,乳源性生物活性因子可以改变 TGF- β 的信号通路,并可能在子猪出生后肠道适应方面扮演重要角色。